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　　甲基磺酸乙酯誘發(fā)的突變主要通過(guò)兩個(gè)步驟來(lái)完成，首先鳥嘌呤的O6位置被烷基化，成為一個(gè)帶正電荷的季銨基團(tuán)，從而發(fā)生兩種遺傳效應(yīng):一是烷化的鳥嘌呤與胸腺嘧啶配對(duì)，代替胞嘧啶，發(fā)生轉(zhuǎn)換型的突變;二是由于鳥嘌呤的N27烷基活化，糖苷鍵斷裂造成脫嘌而后在DNA復(fù)制過(guò)程中，烷基化鳥嘌呤與胸腺嘧啶配對(duì)，導(dǎo)致堿基替換，即G∶C變?yōu)锳∶T。當(dāng)然，化學(xué)誘變存在著染色體結(jié)構(gòu)和數(shù)量方面的誘導(dǎo)變異，但這種單一堿基對(duì)改變而形成的點(diǎn)突變?nèi)允腔瘜W(xué)誘變的主要形式。另外，誘變劑也可與核苷結(jié)構(gòu)的磷酸反應(yīng)，形成酯類而將核苷酸從磷酸與糖分子之間切斷，產(chǎn)生染色體的缺失。這些DNA結(jié)構(gòu)上的變化都可能促使不表達(dá)的基因或區(qū)段被激活，而表現(xiàn)出被掩蓋的性狀。

　　甲基磺酸乙酯誘變技術(shù):

　　化學(xué)誘變技術(shù)是指利用一些化學(xué)物質(zhì)提高生物的自然突變率，這些化學(xué)物質(zhì)就叫做“化學(xué)誘變劑”。其特點(diǎn)有：可操作性強(qiáng)，簡(jiǎn)單易行；特異性較強(qiáng)，能誘變定位到DNA上的某些堿基；后代較易穩(wěn)定遺傳，一般到F3代就可穩(wěn)定；應(yīng)用于遺傳標(biāo)記，是細(xì)胞融合技術(shù)的基礎(chǔ)。

　　誘變劑主要包括5類，他們的特點(diǎn)、機(jī)理和應(yīng)用如下：

　　1、烷化劑：能使一些堿基烷基化，比如使鳥苷酸甲基化，影響mRNA的轉(zhuǎn)錄，從而使蛋白質(zhì)的表達(dá)紊亂，使得蛋白質(zhì)重組，而改變了性狀。臨床上應(yīng)用此類物質(zhì)作為抗癌藥物，具有強(qiáng)烈殺傷癌細(xì)胞的作用，所以在應(yīng)用在于植物上時(shí)，也要注意他的強(qiáng)烈殺傷性。

　　主要有：甲基磺酸乙酯（EMS），是常用的誘變劑，我們?cè)米髡婢倪z傳標(biāo)記，誘變率很高。常用濃度0.05-0.5mol/L，作用時(shí)間5-60min。該物質(zhì)具有強(qiáng)烈致癌性和揮發(fā)性，可用5%硫代硫酸鈉作為終止劑和解毒劑。SIGMA公司價(jià)格：80元/25ml。

　　硫酸二乙酯（DMS），也很常用，但由于毒性太強(qiáng)，目前很少使用，作用機(jī)理和使用方法和EMS基本相同。屬于劇du品。

　　乙烯亞胺，生產(chǎn)的較少，很難買到。只要用于大量誘變育種用，使用濃度：0.0001-0.1%，高度致癌性！使用時(shí)需要使用緩沖液配置。

　　鹽酸氮芥，用于抗癌藥物，可以從藥店買到，但有些地方必須有主任醫(yī)師的處方。

　　一般是針劑，稍加稀釋即可使用，作用時(shí)間5-10min，可用甘氨酸作為終止劑和解毒劑。

　　環(huán)磷酰胺、亞硝基胍等物質(zhì)也可作為誘變劑使用，但較少使用。

　　2、堿基類似物：分子結(jié)構(gòu)類似堿基，導(dǎo)致DNA復(fù)制時(shí)產(chǎn)生錯(cuò)配，mRNA轉(zhuǎn)錄紊亂，功能蛋白重組，表型改變。該類物質(zhì)毒性相對(duì)較小，但負(fù)誘變率很高，往往不易得到好的突變體。主要有：6-溴尿嘧啶、6-BudR、馬來(lái)酰肼、2-氨基嘌呤等，同樣屬于抗癌藥物，可到藥店買到，稍加稀釋即可使用。

　　3、嵌入劑：是分子生物學(xué)比較常用的一類，誘導(dǎo)率較高。原理是這類分子的大小正好可以嵌入堿基分子中，導(dǎo)致錯(cuò)配。常用的：溴化乙錠（EB），高致癌性！價(jià)格較貴，但誘變率很高，是實(shí)驗(yàn)室常用試劑，可以到生化實(shí)際商店買到，1500元/100mg.

　　4、 無(wú)機(jī)化合物：比較容易得到，效果一般，危險(xiǎn)性較小。常用：氯化鋰，白色粉狀，使用時(shí)配成0.1-0.5%的溶液，作用30min-2d?？傻交ど痰曩I到：120元/500克。

　　亞硝酸：沒有現(xiàn)成商品，由于該物質(zhì)易分解，所以現(xiàn)配現(xiàn)用。常用亞硝酸鈉和鹽酸制取，將亞硝酸鈉配成0.01-0.1mol/L的濃度，使用時(shí)加入等濃度等體積的鹽酸即可。

　　過(guò)氧化氫：又名雙氧水，效果不好，所以很少用到。

　　5 其他：鹽酸羥胺，一種還原劑，作用于C上，是G-C變?yōu)锳-T。也較常用，可以買到。使用濃度：0.1-0.5%，作用60min-2h。較便宜。

　　生物堿類：如長(zhǎng)春堿、秋水仙堿、喜樹堿等。

　　以上的誘變劑同時(shí)又是致癌物！使用時(shí)必須小心。通常用來(lái)浸種，方法是將誘變劑加到組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基中，誘變率高。

　　對(duì)人體危害甚大，有一定的致癌作用。操作時(shí)，要嚴(yán)密防護(hù)，切勿讓藥劑沾到皮膚。用過(guò)的工具，也要嚴(yán)格收藏隔離，以防失誤。